Vēlamās zināšanas par mikrobiem
Mikroorganismi ir sīku organismu grupa, kas dabā eksistē plaši un ir neredzama ar neapbruņotu aci un ir jāpalielina simtiem, tūkstošiem vai pat desmitiem tūkstošu reižu ar optiskā mikroskopa vai elektronu mikroskopa palīdzību. To priekšrocības ir mazs izmērs, vienkārša struktūra, ātra pavairošana, viegla variēšana un spēcīga spēja pielāgoties videi.
Mikroorganismu klasifikācija:
Ir daudz veidu mikroorganismu, vismaz vairāk nekā 100,{1}} veidu. Pēc to struktūras, ķīmiskā sastāva un dzīves paradumiem un citām atšķirībām var iedalīt trīs kategorijās.
Eikariotu mikrobu šūnu kodolam ir augstāka diferenciācijas pakāpe, ieskaitot kodola membrānu, kodolu un hromosomas; citoplazmā ir pilnīgas organellas (piemēram, endoplazmatiskais tīkls, ribosoma un mitohondriji utt.). Sēnes pieder pie šāda veida mikroorganismiem.
Prokariotu mikrobu šūnām ir zema kodoldiferenciācijas pakāpe, tikai primitīva nukleoplazma, nav kodola membrānas un kodola; organellas nav ļoti pilnīgas. Ir daudzas šādu mikroorganismu sugas, tostarp baktērijas, spirohetas, mikoplazmas, riketsija, hlamīdijas un aktinomicīti.
Acelulārajiem mikroorganismiem nav tipiskas šūnu struktūras un enzīmu sistēmas enerģijas ražošanai, un tie var augt un vairoties tikai dzīvās šūnās. Vīrusi pieder pie šāda veida mikroorganismiem.
Mikroorganismu atdalīšana un attīrīšana
Mikrobu kultūru, kas satur vairāk nekā vienu sugu, sauc par jauktu kultūru. Ja visas šūnas kolonijā ir iegūtas no vienas vecāku šūnas, tad koloniju sauc par tīrkultūru. Baktēriju sugu identificēšanā izmantotajiem mikroorganismiem parasti ir jābūt tīrkultūrām. Tīrkultūras iegūšanas procesu sauc par atdalīšanu un attīrīšanu, un ir daudz metožu.
1. Pour plate metode
Pirmkārt, mikrobu suspensiju sērijveidā atšķaida un noteiktu atšķaidījuma daudzumu pilnībā sajauc ar izšķīdušo agara barotni, uzturot aptuveni 40-50 grādu, un pēc tam maisījumu ielej sterilā Petri trauciņā. Pēc sacietēšanas plāksne tika inkubēta otrādi nemainīgā kamerā. Viena šūna tiek pavairota, veidojot koloniju, vienu koloniju ņem suspensijas pagatavošanai, un iepriekš minētās darbības atkārto vairākas reizes, lai iegūtu tīru kultūru.
2. Pārklājuma plakanās plāksnes metode
Pirmkārt, mikrobu suspensiju pareizi atšķaida, noteiktu daudzumu atšķaidījuma novieto uz sterilas barotnes agara plāksnes, kas ir sacietējusi, un pēc tam atšķaidījumu vienmērīgi izkliedē uz barotnes virsmas ar sterilu stikla lāpstiņu. Vienu koloniju var iegūt, inkubējot nemainīgā temperatūrā.
3. Plātņu skribēšanas metode
Vienkāršākais veids, kā izolēt mikroorganismus, ir svītrošana. Ar sterilu cilpu uzklājiet nelielu kultūras daudzumu uz plāksnes. Ir daudzas rakstīšanas metodes. Izplatītākās rakstīšanas metodes, kas, visticamāk, veidosies kā viena kolonija, ir slīpsvītra metode, līknes metode, kvadrātveida metode, starojuma metode un četru režģu metode. Kad inokulācijas cilpa virzās atpakaļ uz barotnes virsmas, baktēriju šķidrums uz inokulācijas cilpas tiek pakāpeniski atšķaidīts, un visbeidzot uz novilktās līnijas tiek izkaisīta viena šūna. Pēc kultivēšanas katra šūna pāraug kolonijā.
4. Bagātināšanas kultūras metode
Bagātināšanas kultūras metodes metode un princips ir ļoti vienkārši. Mēs varam radīt apstākļus, kas ļauj augt tikai vēlamajiem mikrobiem, un šajos apstākļos vēlamie mikrobi var efektīvi konkurēt ar citiem mikrobiem un augšanas spēju ziņā krietni pārspēt citus mikrobus. Ja ir jāizolē daži obligātie parazīti, paraugi ir jāiepotē attiecīgajās uzņēmīgo saimniekšūnu populācijās, lai tie augtu lielā skaitā. Tīras parazītiskās baktērijas var iegūt, atkārtoti sējot.
5. Anaerobā metode
Laboratorijā, lai izolētu dažas anaerobās baktērijas, kā kultivēšanas trauku var izmantot mēģeni, kurā ir oriģinālā barotne, un mēģeni var vairākas minūtes karsēt verdoša ūdens vannā, lai izvadītu barotnē izšķīdušo skābekli. . Pēc tam to ātri atdzesē un inokulē. Pēc inokulācijas barotnes virsmai pievienoja sterilu parafīnu, lai barotni izolētu no gaisa. Vēl viena metode ir aizstāt gāzi barotnē ar N2 vai CO2 pēc inokulācijas un pēc tam aiztaisīt mēģenes muti virs liesmas. Dažreiz, lai efektīvāk izolētu dažas anaerobās baktērijas, izolēto paraugu var inokulēt uz barotnes un pēc tam Petri trauciņu ievietot pilnībā noslēgtā anaerobās kultūras ierīcē.
6. Vienas šūnas (vai vienas sporas) izolācijas metode
Ir jāizmanto mikroseparācijas metode, lai tieši izolētu atsevišķas šūnas vai atsevišķus indivīdus no jauktām populācijām kultūrai, lai iegūtu tīru kultūru. Lielākiem mikroorganismiem vienu indivīdu var ekstrahēt, izmantojot kapilāru. Mikroorganismiem ar salīdzinoši maziem indivīdiem ir nepieciešams mikromanipulators, lai ar kapilāru vai mikroadatu, āķi, cilpu utt. zem mikroskopa savāktu atsevišķas mikrobu šūnas vai sporas, lai iegūtu tīrkultūru. Vienšūnas atdalīšanas metodei ir salīdzinoši augstas prasības darbības tehnoloģijai.
Mikrobu kultūra
1. Pēc tā, vai kultivēšanas laikā ir nepieciešams skābeklis, to var iedalīt divās kategorijās: aerobā kultūra un anaerobā kultūra.
Aerobā kultūra: pazīstama arī kā "aerobā kultūra". Proti, kultivējot šo mikroorganismu, tam ir jāpievieno skābeklis, citādi tas neaugs labi. Laboratorijā šķībās kultūras iegūst, no ārpuses caur vates aizbāžņiem iegūstot sterilu gaisu. Lielāko daļu Erlenmeijera kolbā esošās šķidrās kultūras sakrata ar kratītāju, lai āra gaiss nepārtraukti varētu iekļūt pudelē.
Anaerobā kultūra: pazīstama arī kā "anaerobā kultūra". Šādiem mikroorganismiem nav nepieciešams skābeklis, lai piedalītos audzēšanā. Anaerobo mikroorganismu kultivēšanas procesā vissvarīgākais ir izvadīt barotnē esošo skābekli.
2. Pēc barotnes fizikālā stāvokļa to var iedalīt divās kategorijās: cietā kultūra un šķidrā kultūra.
Cietā kultūra: tā ir metode celmu inokulēšanai brīvā un barības vielām bagātā cietā barotnē un mikroorganismu kultivēšanai piemērotos apstākļos.
Šķidrā kultūra: eksperimentos šķidrā kultūra var likt mikroorganismiem ātri vairoties un iegūt lielu skaitu kultūru. Noteiktos apstākļos tā ir arī efektīva metode mikroorganismiem, lai atlasītu un bagātinātu baktērijas.
BKMAM biotech nodrošina atbilstošus laboratorijas palīgmateriālus mikrobu kultūrai:
Vienreizējās lietošanas plastmasas apaļie/kvadrātveida Petri trauciņi:
Augstas caurspīdīguma polistirola materiāls (PS);
Virsma ir gluda un plakana, un mikroskopā nav redzami šūnu optiski kropļojumi;
l Sakraušanas dizains atvieglo sakraušanu un uzglabāšanu;
l Etilēnoksīda sterilizācija (EO);
l Nodilumizturība un korozijas izturība.
Vienreizējās lietošanas plastmasas inokulācijas kociņš/cilpa:
Polistirola materiāls (PS);
Pretpiesārņojums, bez endotoksīniem, DNS, RNāzes un pirogēniem;
Neatkarīgs iepakojums ir sterilizēts;
Smalka meistarība un pilnīgas specifikācijas;
Vienreizējās lietošanas plastmasas šūnu izplatītājs, baktēriju izplatītājs:
Polistirola materiāls (PS);
Pretpiesārņojums, bez endotoksīniem, DNS, RNāzes un pirogēniem;
L-veida dizains, viegli lietojams;
Vienreizēja lietošana, viegla un ērta.
Nerūsējošā tērauda/vienreizējās lietošanas sterilās specifikāciju plāksnes:
Nerūsējošā tērauda specifikāciju plāksne ir izgatavota no nerūsējošā tērauda, un vienreizējās lietošanas specifikācijas plāksne ir izgatavota no pārtikas polipropilēna (PP).
Pretpiesārņojums, bez endotoksīniem, DNS, RNāzes un pirogēniem;
Smērēšanas laukums ir stingri standartizēts
Viena specifikācijas plāksnītes puse ir aprīkota ar rokturi, kas ir ērti lietojams
Sterils aizzīmogots viens iepakojums, lai izvairītos no paraugu ņemšanas sekundārā piesārņojuma un kļūdu rezultātos
Vienreizēja lietošana, lai izvairītos no savstarpējas piesārņošanas un samazinātu darba slodzi
Laipni lūdzam sadarboties ar mums
Ar cieņu
Maikls Pengs
michael@bkmbio.com
